Zalety i wady separacji dializacyjnej
Zalety: wysoki wskaźnik odzysku próbki; prosta obsługa, brak konieczności żmudnych prac przygotowawczych; łagodne warunki separacji.
Wady: czasochłonność; duża różnica masy cząsteczkowej między próbką i zanieczyszczeniem.
Jak używać suchego worka do dializy
1. Wytnij worek dializacyjny o odpowiedniej długości (np. 10 cm);
2. Gotować w dużej objętości (50ml) 2% (W/V) wodorowęglanu sodu i 1mmol/l EDTA.2Na (pH 8,0) przez 10 minut;
3. Po wyjęciu worek dializacyjny należy dokładnie umyć wodą destylowaną;
4. Gotować w 500ml 1mmol/l EDTA.2Na (pH 8,0) przez 10 minut, wyjąć i dokładnie umyć wodą destylowaną;
5. Jeżeli worek dializacyjny nie jest używany tymczasowo, należy go całkowicie zanurzyć w roztworze do przechowywania worków dializacyjnych, który można przechowywać w temperaturze 4-37 stopni;
6. Przed wyjęciem worka dializacyjnego zanurzonego w roztworze do przechowywania worków dializacyjnych, napełnij worek wodą, a następnie opróżnij go, wyczyść i wypłucz wewnątrz i na zewnątrz trzy razy.
Wskazówka: Jeśli wymagania eksperymentalne nie są wysokie, można zastosować prostą metodę obróbki, czyli gotować go we wrzącej wodzie przez 10 minut przed użyciem.
Poniższa procedura dializy jest ogólnym, podstawowym procesem dializy
Istnieje wiele zmiennych, które należy wziąć pod uwagę przed rozpoczęciem dializy. Zmienne takie jak rozpuszczalnik dializowanej próbki, zgodność chemiczna membrany, odcięcie masy cząsteczkowej membrany, dializowany rozpuszczalnik, dializowana objętość, temperatura itp. będą miały wpływ na szybkość dializy. Dlatego poniższa procedura dializy może wymagać odpowiednich zmian w niektórych zastosowaniach.
1. Dodać odpowiednią ilość dializatu (buforu) do urządzenia dializacyjnego;
2. Odetnij odpowiednią długość rurki dializacyjnej, pozostawiając dodatkowy fragment;
3. Włóż rurkę dializacyjną do otwartego zacisku dializacyjnego i zaciśnij ją około 3-5 mm poza zacisk dializacyjny. Nie składaj worka dializacyjnego;
4. Załaduj próbkę z otwartego końca rurki dializacyjnej. Dostosuj długość przestrzeni nad cieczą i zaciśnij zacisk dializacyjny;
5. Umieścić dializowaną próbkę w odpowiednim buforze dializacyjnym;
6. Dializa powinna być oparta na konkretnych wymaganiach aplikacji. Generalnie, dopuszcza się dializę nocną. Podczas ciągłej dializy, należy wykonać co najmniej 3 kompletne wymiany dializatu. Zaleca się, aby dializat był wymieniany 2-4 godzin, 6-8 godzin i 10-14 godzin (rano następnego dnia) po sesji dializacyjnej. Dializę należy kontynuować przez co najmniej 2 godziny po ostatniej zmianie dializatu.